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光學(xué)偏光顯微鏡的構(gòu)造和使用方法

發(fā)布人:shpuda發(fā)布時間:2014/4/25

    在植物學(xué)實(shí)驗(yàn)課中,經(jīng)常需要使用光學(xué)偏光顯微鏡(以下簡稱顯微鏡)觀察植物體內(nèi)的各種結(jié)構(gòu)。雖然大部分同學(xué)在中學(xué)已使用過顯微鏡,但有關(guān)顯微鏡的構(gòu)造和正確的使用方法還沒有完全幸握。因此,在使用顯微境之前,必須認(rèn)真復(fù)習(xí)并掌握顯微鏡的構(gòu)造和使用方法,才能更好地發(fā)擇顯微鏡的作用,進(jìn)免發(fā)生損壞。


    偏光顯微鏡和壓破蓋玻片等事故。


    一、偏光顯微鏡的構(gòu)造


    顯微鏡可分為光學(xué)系統(tǒng)和機(jī)械裝置兩部分(圖1一1)。

 


    (一)光學(xué)系統(tǒng)


    (1)物鏡:放大倍數(shù)越高越長。接近標(biāo)本,因此也叫接物鏡。物鏡安裝在鏡筒的下端。它的作用是將標(biāo)本作第一次放大,然后再由目鏡將第一次放大的像作第二次放大。


    物鏡是決定偏光顯微鏡性能的最重要部件,即決定分拼力的高低,偏光顯微鏡越好,分辨力越高。


    分拼力是指分腳細(xì)微結(jié)構(gòu)最小間隔的能力。人眼的分辨力為100μm,顯微鏡的分辨力以下式計算:


                          R=0.61λ/NA


    R指兩個微點(diǎn)間的距離,R越小,分辨力越高,λ為光波波長,NA為鏡口率。目前在實(shí)用范圍內(nèi)物鏡的最大鏡口率為1.4.而可見光最短波長為0.41.m,代入公式則:


                          R=0.61x0.4/1.4=0.17


    由此可見,光學(xué)偏光顯微鏡的最大分辨力約為0.2μm.差不多為可見光最短光波的一半。


    通常物鏡分為三種:放大倍數(shù)10倍(lox)以下的叫低倍鏡;放大倍數(shù)20倍(20 x)左右的叫中倍鏡;放大倍數(shù)40-65倍(40x-65x)的叫高倍鏡。此外還有一種放大倍數(shù)為90-100倍的叫油鏡。


    在每個物鏡上除標(biāo)有放大倍數(shù)外。還標(biāo)有其他效值,如10倍鏡上標(biāo)有10/0.25和160/0.17等。此處10為物鏡的放大倍數(shù)0.25為鏡口率,160為鏡簡長度,0.17為蓋玻片的厚度,兩者單位均為毫米(mm)。


    放大倍效低的物鏡,構(gòu)造越簡單,熱距越長;反之,放大倍數(shù)高的,構(gòu)造越復(fù)雜,焦距越短。物銳和標(biāo)本的蓋玻片上面的距離稱為工作距離,物鏡的工作距離和物鏡的放大倍數(shù)有直接關(guān)系,放大倍數(shù)大的工作距離短,放大倍教小的工作距離長。因此,在使用高倍鏡時,由于工作距離短,要特別注意不要使物鏡直接碰到標(biāo)本片,以免損壞鏡頭。

    (2)目鏡:安裝在鏡簡上端,作用是把己經(jīng)被物鏡放大了的物像進(jìn)一步放大。它相當(dāng)于一個放大鏡,并不增加偏光顯微鏡的分辨力,一般常用的目鏡放大倍數(shù)為4-20倍。


    (3)聚光器:載物臺中央,通光孔下方的聚光鏡和可變光附合稱聚光器,獲光鏡相當(dāng)于一組凹透鏡,可匯集來自內(nèi)代光X的光(或反光鏡反射的光)。可變光闌又叫虹彩光圈,位于攝光鏡下方,由十幾片金屬薄片組成,中心部分形成圓孔,推動虹彩光圈的把手。可以隨愈調(diào)節(jié)圓孔的大小,選擇適當(dāng)?shù)墓鈴?qiáng)。


    (4)照明器:也稱內(nèi)跪光源,通常采用高亮度、高效率的鹵素?zé)艉头乔蛎婢酃忡R。


    (5)反光鏡:沒有照明器的偏光顯微鏡都有反光鏡,即安放在鏡住或談座上的圓形平凹雙面鍵,可作各方向轉(zhuǎn)動,對準(zhǔn)光諫(采自然光或燈光),把光線反射到聚光器。平面鏡只具反光作用,凹面兼具反光和取光作用,通常光線較弱時使用凹面鏡,強(qiáng)光時用平面談。


    (二)機(jī)械裝置


    (1)鏡座:偏光顯微鏡最下方的底座,它支持顯微鏡的全部重量,并使顯微鏡能平穩(wěn)放置桌面上。


    (2)鏡臂:連接鏡簡和載物臺,并為移動偏光顯微鏡時手執(zhí)處。


    (3)鏡簡:目鏡下方的空圓簡。


    (4)轉(zhuǎn)換器:位于鏡筒下方,可同時安放3-4個不同倍率的接物鏡,根據(jù)需要而轉(zhuǎn)換使用。


    (5)載物臺:連接于鏡價下端之方形或圓形平臺,用來放談玻片。中央有一通光孔,光線由此通過。載物臺上有推進(jìn)器,便于移動玻片進(jìn)行觀察。


    (6)調(diào)焦裝置:鏡臂上端有大小各一對螺旋,用來升降鏡筒以調(diào)整焦距。大的為粗準(zhǔn)焦螺旋,也稱粗調(diào)節(jié)器螺旋,旋轉(zhuǎn)一周可升或降鏡簡10mm。小的是細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,也稱細(xì)調(diào)節(jié)器螺旋,旋轉(zhuǎn)一周可使鏡筒開或降0.1mm,另一類偏光顯微鏡是通過升降毅物臺來調(diào)焦的,故調(diào)焦螺旋在鏡臂下端。

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